ють через овоскоп, полеглі відбраковуються, а у життєздатних олівцем обводятся межі повітряного порожнини.
При вихідному титрі вірусу 10 8 -10 9 ТЦД 50 /мл заражає доза становить 0,2 мл розведення 10 -4 . Ця доза вводиться в ембріон шприцом через повітряну порожнину з дотриманням умов стерильності. Місце проколу в шкаралупі заливається парафіном і ембріони инкубируются 2-і доби при 37 В° С.
Після інкубації ембріони охолоджують при 4 В° С протягом 3-4 годин, потім у строго стерильних умовах розкривають з боку повітряної порожнини і візуально оцінюють їх життєздатність. Полеглі - відбраковують, а з інших пастерівської піпеткою (за допомогою вакууму або груші) відсмоктують алантоїсну рідина, яка і служить надалі джерелом вірусу.
віруссодержащего аллантоісную рідина контролюють на бактеріологічну стерильність. Визначають інфекційний титр в культурі курячих фібробластів і титр гемаглютинінів.
Контроль на стерильність. здійснюють висівом I мл аллантоісной рідини з кожного флакона на поживні cpeди - цукровий бульйон і середовище Сабуро. Посіви інкубують протягом 7 діб, на цукровому бульйоні при 37 В° С, а на середовищі Сабуро - при кімнатній температурі.
Інфекційний титр визначають в культурі фібробластів. У 3-х добову культуру зі сформованим монослоем клітин вводяться різні розведення (від 10 -7 до 10 -10 ) алантоїсну рідини. Культури інкубують 3-е діб при 37 В° С і потім переглядають під мікроскопом.
Максимальні розведення, які надають в культурі цитопатическое дію, приймаються за ТЦД вірусу (титр цитопатичної дії).
_Тітр гемаглютинінів визначається стандартним методом постановки реакції гемагллютінаціі з використанням курячих еритроцитів (0,5%).
Титр гемаглютинінів не є провідною характеристикою вірусів і постановка реакції гемаглютинації не є обов'язковою для кожної партії вірусу.
У виробництві допускається використання тільки бактеріологічно стерильного вірусу з інфекційним титром 10 -8 -10 -9 /1 мл ТЦЦ 50 і титром гемаглютинінів 250 - 1000.
Вірус хвороби Ньюкасла представляє велику цінність для виробництва, тому повинні бути прийняті заходи до того, щоб зберегти його чистоту і інтерфероногенні властивості. Категорично забороняється безперервне використання пассирование вірусу: в якості вихідного матеріалу при зараженні використовують кращу партію вірусу, яку після контролю розливають по I мл в ампули та ліофілізують.
Після ліофілізації ця партія надалі вважається робочим стандартом вірусу.
Робочий стандарт вірусу контролюють описаними методами на бактеріологічну стерильність, інфекційний титр і титр гемаглютинінів. Потім в обов'язковому порядку вірус ідентифікують. p> Ідентифікацію вірусу хвороби Ньюкасла проводять постановкою стандартної реакції гальмування гемаглютинації з антисироватк...
