з діаметром фібрил 150-500 нм з різноспрямованими і паралельними волокнами і матриці з діаметром фібрил 800-3000 нм так само з різноспрямованими і паралельними волокнами. Для електроспінніга 5% розчину PLLA використовувалися голки 18G, для розчинів із збільшеною концентрацією - 22G. Відстань між голкою і колектором становило 10 см. Для створення паралельних волокон використовували мандрелей обертається зі швидкістю 1000 об./Хв. Для подолання сил поверхневого натягу розчину був обраний струм напругою в 12кВ. При веденні на отриманих матрицях нейральних стовбурових клітин лінії С17.2 з'ясувалося, що вже до 2му дню в культурі клітини набувають витягнуту біполярну морфологію. При цьому елонгація клітин на матрицях завжди йшла вздовж напрямку фібрил, тобто на матрицях з паралельним розташуванням волокон клітини витягувалися і вирощували відростки завжди паралельно волокну. На матрицях з хаотичним розташуванням фібрил клітини подовжувалися різноспрямовано. На додаток було відзначено, що зміни морфології клітин, їх елонгація і поява відростків, спостерігалося лише у 40% при веденні культури на матриці з діаметром фібрил 0,8-3 мкм і в 80% при веденні на матриці з волокнами в 150-500 нм. Оскільки найважливішим аспектом в регенерації нервової тканини є можливість зростання відростків - аксона і дендритів, вчені зробили висновок, що для відтворення нервовий тканини необхідно використовувати паралельні нановолокна, які дуже зручно створювати методом елетроспінннга [7].
На наступному етапі у створенні матриць вчені до синтетичного 9% полимеру полі-L-лактид-ко-полікапролактон (PLCL) додали білок позаклітинного матриксу - колаген I типу. Для елеткроспінніга використовували голки діаметром 27G. Швидкість подачі розчину становила 1 мл/годину, вольтаж електричного струму 15 кВ, відстань від голки до колектора 12см. При веденні людських мезенхімальних стовбурових клітин (hMSC) в нейрогенної середовищі на даних матрицях, у порівнянні з матрицями з чистого PLCL, було відзначено кілька закономірностей. По-перше, матриці з додаванням колагену виявилися більш гідрофільних - водний контактний кут 57 ± 5 о, проти матриць з чистого PLCL, де водний контактний кут склав 127 ± 8 о, що робить їх більш комфортним середовищем для життєдіяльності клітин, оскільки поживні речовини в організмі розчинені саме у воді міжклітинної рідини. Вдобавок суттєво відрізнялися і механічні властивості отриманих матриць. Так межа міцності на розрив для матриць з додаванням колагену в три рази перевершував такий матриць з чистого PLCL (4,61 ± 0,69 МРа проти 1,42 ± 0,40 МРа), що немало важливо для періоду нейрогенеза - необхідно забезпечити цілісність конструкції під час мобілізації хворого. По-друге, при використанні колорометріческого методу була виявлена ??значно більша проліферація клітин знаходяться на матрицях PLCL/ColI щодо культур розвиваються на чистому PLCL (індекс абсорбції +1300 проти 900). А так само іммуноцітохіміческіе аналіз показав достовірно більшу відкладення нейрофіламенти 200 і нестін - маркерів нервової тканини культурами, зростаючими на матрицях з PLCL/ColI. Морфологія клітин в обох випадках ставала нейроподібні - клітини збільшувалися і приймали мультиполярним многоотростчатую форму [8].
Таким чином, додавання білка натурального позаклітинного матриксу до матриці не тільки підсилює її механічну міцність, але і робить матрицю більш ефективною для проліферації і диференціювання клітин.
. Шкіра
Одним з перспективних напрямів застосування електроспіннінга є створення покривають рани конструкцій, для терапії обширних шкірних дефектів. Адже на даний момент шкірна аутопластика прирікає хворого на безліч запрограмованих операцій, членоушкодження донорських ділянок шкіри і вкрай тривалий час відновлення.
Займаючись даною проблемою група вчених створила з полілактиду-ко-гліколід (PLGA, молекулярна вага 70 кDa, лактид/гліколід=75/25) три типи полімерних матриць розрізняються по діаметру пір, порозности і ступеня гідрофільності. Перший тип матриць ніс пори розміром 21.0 ± 4.8 мкм, мав порозность 68.2 ± 3.7% і водний контактний кут 131.0 ± 4.6. Другий тип мав наступні параметри (у порядку перерахованому вище) 59.5 ± 16.3 мкм, 79.1 ± 5.2%, 112.4 ± 6.5. І третій 132.7 ± 39.6 мкм, 92.4 ± 4.3%, 76.1 ± 8.5. Різні характеристики матриць отримали шляхом зміни конфігурації приймального колектора: в 1м випадку - плоский нерухомий колектор, у 2м - циліндричний мандрелей обертається зі швидкістю 28 об./Хв., В 3м - циліндричний мандрелей обертається зі швидкістю 60 об./Хв. Параметри електроспіннінга для створення даних матриць були наступними: голка діаметром 0,6 мм, швидкість подачі розчину 0,5 мл/год, напруга струму 20кВ. Аналіз фізичних властивостей матриць показав, що механічна міцність матриць знижується у міру зростання їх порозности. Для дослідження біореактивних властивостей мат...
