0,70 ммоль/(год? Л). У клінічній практиці визначення активності цього ферменту використовується при діагностиці інфаркту міокарда (причому підвищення активності його спостерігається через 3 години після початку некротичного процесу і досягає максимуму через 24 год), а також при дистрофії скелетних м'язів, ураженні нервової тканини. br/>
2. Аналіз пігментів і окислювальних процесів фотосинтезуючих організмів
У клітинах фотосинтезуючих організмів є система пігментів (хлорофіли, фікобіліни, каротиноїди) вибірково вловлюють кванти світла у видимій області спектра, які потім трансформуються в енергію фосфатних зв'язків АТФ. У темнової період доби ці організми перетворюють енергію окислювально-відновних реакцій в енергію АТФ як хемотрофи. p align="justify"> У мітохондріях тварин і рослинних клітин функціонують подібні ферменти біологічного окислення та системи трансформації енергії в дихального ланцюга. Дослідження цих процесів проводиться аналогічними методами, що й у гетеротрофних організмах. У той же час в рослинах відзначається висока активність ряду оксидаз (пероксидаза, поліфенолоксидаза та ін), які беруть участь в окисленні вторинних продуктів обміну. ​​br/>
Робота 44. Якісні реакції на пігменти рослин
Реактиви. Етанол, 96%-ний; бензин; гідроксид барію, насичений розчин; аскорбінова кислота, кристалічна; соляна кислота, 10%-ний розчин. p align="justify"> Обладнання. Водяна баня з лабораторним термометром; штатив із пробірками; крапельниці; піпетки місткістю 5 мл; аптечні ваги з важками; ступка з товкачиком. p align="justify"> Матеріал. Листя кропиви, сушені. p align="justify"> а. Екстрагування пігментів з листя кропиви. Метод заснований на здатності хлорофілу та інших пігментів під дією гарячого спирту переходити в розчин, при цьому хлорофіл при взаємодії зі спиртом перетворюється на етілхлорофіллід - складний ефір, в якому залишок фитола заміщений залишком етилового спирту. p align="justify"> Хід визначення. 0,5 г сушеної кропиви розтирають у ступці з 5,0 мл етилового спирту, переносять у пробірку і нагрівають на водяній бані при 90-100? С до закипання спирту. Вміст фільтрують через паперовий фільтр в іншу пробірку. Фільтрат, що містить хлорофиллид, ксантофилл та інші пігменти, має зелений колір з інтенсивним червоним флюоресценцією. Його використовують для дослідження. p align="justify"> б. Поділ пігментів по Краусу. Метод заснований на різній здатності пігментів розчинятися в бензині: хлорофіл, хлорофиллид розчиняються, а ксантофилл розчиняється в ньому. p align="justify"> Хід визначення. До 10 крапель отриманого фільтрату додають рівний об'єм бензину, вміст ретельно струшують, постукуючи пальцем по дну пробірки. Спостерігають за забарвленням пігментів, що містяться в різних розчинниках. p align="justify"> в. Осадження хлорофілу. Метод заснований на здатності ефірних груп при омиленні розчином гідроксиду барію утворювати барієві солі хлорофиллид А і В, нерозчинних у воді; рідина над осадом має жовте забарвлення внаслідок присутності у витяжці каротину і ксантофилла. p align="justify"> Хід визначення. До 10 крапель фільтрату додають 20 крапель розчину гідроксиду барію і ретельно збовтують. Спостерігають за змінами, що відбуваються. p align="justify"> р. Відновлення хлорофілу аскорбінової кислотою. Метод заснований на здатності аскорбінової кислоти відновлювати хлорофіл, який отримує внаслідок цього жовте забарвлення. p align="justify"> Хід визначення. До 10 крапель фільтрату додають 2 краплі води, кілька кристаликів аскорбінової кислоти і протягом 3-5 хв нагрівають у водяній бані при 70-80? С. Спостерігають за зміною забарвлення. p align="justify"> д. Отримання феофитина із хлорофілу. Метод заснований на здатності соляної кислоти зв'язувати іон магнію, що входить до складу хлорофілу, з утворенням феофитина, що має оливково-буре колір. p align="justify"> Хід визначення. До 5 крапель фільтрату додають 1 краплю розчину соляної кислоти. Спостерігають за зміною забарвлення. p align="justify"> Оформлення роботи. Дати оцінку якісним реакціям на пігменти рослин. У висновках обгрунтувати значення хлорофілу та інших пігментів для фотосинтетичних процесів. p align="justify"> Практичне значення роботи. Методи розділення і аналізу пігментів фотосинтетичного апарату рослин використовуються для вивчення фізико-хімічних властивостей, фотохімічної активності та характеристики їх складу на різних стадіях онтогенезу рослин та впливу на нього факторів зовнішнього середовища. br/>
Робота 45. Визначення активності пероксидази в рослинному матеріалі за методом А.Н. Бояркіна
Реактиви. Ацетатний буфер, 0,1 М розчин з рН 5,4 *; пероксид водню, 0,03%-ний розчин; бензидин, 0,92 г/л розчин на ацетатному буфері *. p align="justify"> Обладнання. Колби місткістю 25 мл; піпетки місткістю 5 мл; центрифуга лабораторна з Центрифужна вагами; ФЕК...
