ноградної кислоти в крові і зробити висновок про причину можливих його змін. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі вміст пірувату в крові становить 0,1-0,13 ммоль/л. Його рівень підвищується при нестачі в організмі тіаміну (вітаміну В1), а також в результаті дії інгібіторів піруватоксідантного комплексу (арсенат, люізіт та ін.) br/>
ОБМІН ЛІПІДІВ
Для вивчення стану ліпідного обміну в організмі використовується визначення змісту ліпідних компонентів у біологічних рідинах. Різні ліпіди входять до складу сложноорганізованних комплексів - ліпопротеїдів - або адсорбуються білками, в основному альбумінами, плазми або сироватки крові. У крові містяться хіломікрони, що утворюються в слизової тонкого кишечника і надходять у неї з лімфою, пре-? - ліпопротеїди (ліпопротеїди дуже низької щільності), ? - ліпопротеїди (ліпопротеїди низької щільності) і ? - ліпопротеїди (ліпопротеїди високої щільності). Апопротеіди трьох останніх класів ліпопротеїдів синтезуються в печінці, тому за змістом ліпопротеїдів в крові судять не тільки про ліпідному обміні, а й функції печінки.
При дослідженні обміну ліпідів у клініці визначають вміст ліпопротеїдів, загальних ліпідів, що включають суму усіх ліпідних речовин сироватки або плазми крові, а також окремі їх фракції - тріацілгліцеріни, неетеріфіцірованних жирні кислоти, вільний та етерифікованих холестерин, фосфоліпіди.
Робота 50. Визначення вмісту сумарних ліпідів у сироватці крові за реакцією з сульфофосфованіліновим реактивом
Реактиви. Сірчана кислота, конц.; Фосфованіліновий реактив *. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; піпетки для відмірювання сильних кислот; піпетки місткістю 0,1; 1 і 10 мл; скляні палички; водяна баня; ФЕК. p align="justify"> Матеріал. Сироватка крові. p align="justify"> Метод заснований на здатності продуктів розпаду ненасичених ліпідів утворювати з фосфованіліновим реактивом з'єднання, інтенсивність забарвлення якого пропорційна вмісту загальних ліпідів у сироватці крові.
Хід визначення. В дослідну пробірку (сухую!) вносять 0,1 мл сироватки крові і 2,9 мл концентрованої сірчаної кислоти (обережно! Спеціальними піпетками!), А в контрольну - 0,1 мл дистильованої води і 2,9 мл концентрованої сірчаної кислоти. Вміст обох пробірок ретельно перемішують скляною паличкою і поміщають в киплячу водяну баню на 10 хв (обережно!). Потім обидві пробірки швидко охолоджують під струменем холодної води до кімнатної температури. З дослідної і контрольної пробірок відбирають по 0,2 мл охолодженого вмісту в інші пробірки, в які заздалегідь наливають фосфованілінового реактиву по 3 мл в обидві пробірки. p align="justify"> Після ретельного перемішування скляною паличкою проби ставлять на 45 хв у темне місце при кімнатній температурі (для розвитку фарбування).
Фотометрують дослідну пробу проти контрольної на ФЕК при 500-560 нм (зелений світлофільтр), в кюветі з товщиною шару 0,5 см.
Розрахунок. Вміст загальних ліпідів у сироватці крові х (г/л) розраховують за формулою
m10000? 3
х = -------,
0,2? 1000
де m - маса загальних ліпідів у пробі, знайдена за калібрувальним графіком (рис.6), мг;
- коефіцієнт перерахунку на 1 л сироватки крові;
- коефіцієнт перерахунку міліграмів у грами;
- загальний обсяг вихідної суміші (0,1 мл сироватки крові + 2,9 мл концентрованої сірчаної кислоти), мл;
, 2 - об'єм суміші, взятої для проведення кольорової реакції, мл.
В
Оформлення роботи. По знайденому значенню екстинкції розрахувати вміст загальних ліпідів у крові, вказавши на можливі зміни в їх змісті і причину цих змін. У висновках відзначити практичне використання методу визначення загальних ліпідів в клінічній лабораторії для виявлення порушень ліпідного обміну. ​​p align="justify"> Практичне значення роботи. Нормальний вміст загальних ліпідів у сироватці крові (нормоліпемія) становить 4,0-8,0 г/л. При фізіологічних умовах збільшення вмісту ліпідів у крові (гіперліпемія) спостерігається через 1-4 год після прийняття багатої жирами їжі. Натщесерце рівень загальних ліпідів знижується (гіполіпемія). Гіперліпемія проявляється при багатьох патологічних станах: у хворих на цукровий діабет відзначається різко виражена гіперліпемія (до 20,0 г/л), при захворюваннях нирок (липоидном нефрозі), при ураженні печінки (цирозі печінки і гострому гепатиті), при ожирінні, при вродженій Гіперліпемія , атеросклерозі і в осіб, що зловживають ...
