іншу - хворого пацієнта і висушують смужки на повітрі. На кожну пляму наносять 1 краплю реактиву Миллона. Через 2 хв відзначають появу характерного оранжевого забарвлення. p align="justify"> Для напівкількісної оцінки результатів на чотири смужки фільтрувального паперу наносять по 1 краплі стандартних розчинів тирозину, відповідних концентрацій 0,3; 0,4; 0,5 і 0,6 г/л. Підсушують смужки на повітрі і в ці ж зони вносять по краплі реактиву Миллона. p align="justify"> Нижня межа чутливості реакції при вмісті досліджуваних субстанцій 0,3 г/л. Порівнюють інтенсивність забарвлення досліджуваних проб сечі з кольоровою шкалою стандартних розчинів тирозину і встановлюють приблизний зміст визначаються субстанцій в сечі. p align="justify"> Оформлення роботи. Замалювати кольорову шкалу тирозину і забарвлення досліджуваних проб сечі, дати напівкількісну оцінку останнім. У висновку вказати на можливість застосування проби Миллона для експрес-діагностики тірозіноз. p align="justify"> Практичне значення роботи.
У нормі вміст тирозину в плазмі крові у дітей до 1 місяця становить 90-140 і у дітей від 2 місяців до 14 років - 55-110 мкмоль/л; екскреція з сечею цієї амінокислоти у дітей до року дорівнює 4-30 і від року до 14 років - 5-88 мкмоль/добу. При тірозіноз концентрація в цих біологічних рідинах збільшується в 2 рази і більше і проби на присутність їх стають позитивними. br/>
Робота 69. Виявлення алкаптонуріі пробою на гомогентизинової кислоту
Алкаптонурія - спадкове захворювання, пов'язане з дефектом гомогентізінатоксідази, що здійснює перетворення гомогентизинової кислоти в фумарілацетоуксусную. Пі цьому захворюванні накопичується в середовищах організму гомогентизинова кислота. p align="justify"> Реактиви. Гідроксид натрію, 10%-ний розчин; реактив молібдату амонія *; дигідрофосфат калію, 1%-ний розчин. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; очні піпетки. p align="justify"> Матеріал. Сеча, нормальна і патологічна *. p align="justify"> а. Проба на гомогентизинової кислоту з лугом. Метод заснований на окисленні гомогентизинової кислоти киснем повітря в лужному середовищі з утворенням пігментного продукту синьо-фіолетового кольору. p align="justify"> Хід визначення. В одну пробірку вносять 10 крапель нормальної, а в іншу - патологічної сечі, додають по 2 краплі розчину гідроксиду натрію, струшують і спостерігають за зміною фарбування 1-2 хв. p align="justify"> Проба позитивна при наявності синьо-фіолетового забарвлення, що свідчить про присутність гомогентизинової кислоти.
б. Проба на гомогентизинової кислоту з молібденовим реактивом. Метод заснований на здатності гомогентизинової кислоти відновлювати молібдат амонію з утворенням молібденової сині (див. роботу 11). p align="justify"> Хід визначення. В одну пробірку вносять 2 краплі сечі здорового, в іншу - 2 краплі сечі хворого пацієнта. У кожну пробірку додають по 10 крапель води і по 4 краплі розчину однозаміщеного фосфату калію. Пробірки струшують. p align="justify"> Проба позитивна при наявності синього забарвлення, обумовленого присутністю в сечі гомогентизинової кислоти.
Оформлення роботи. Відзначити наявність гомогентизинової кислоти в досліджуваній сечі; у виведенні вказати на можливість використання застосовуваних проб для діагностики. p align="justify"> Практичне значення роботи. Проби на гомогентизинової кислоту використовуються для діагностики алкаптонуріі, так як в нормі ця кислота в сечі відсутній. br/>
Робота 70. Виявлення цістінуріі йод-азідной пробою на цистин і гомоцистину в сечі
Реактиви. Йод-азідний реактив (1,5 г азиду натрію розчиняють у 50 мл 0,1 М розчину йоду і доводять об'єм до 100 мл етанолом), L-цистин, стандартні розчини концентрації 0,3; 0,4, 0,5, 0 , 6 г/л.
Обладнання. Смужки фільтрувального паперу 10х20 мм; очні піпетки. p align="justify"> Матеріал. Сеча, нормальна і патологічна *. p align="justify"> Метод заснований на здатності йод-азідного реактиву знебарвлюватися у присутності цистину або гомоцистину.
Хід визначення. На дві смужки фільтрувального паперу наносять по 1 краплі нормальної і патологічної сечі, висушують на повітрі і на висушені плями додають по 1 краплі йод-азідного реактиву. p align="justify"> На чотири смужки фільтрувального паперу наносять по 1 краплі стандартних розчинів цистину, висушують на повітрі і додають на висушені ділянки по 1 краплі йод-азідного реактиву.
Проба вважається позитивною, якщо забарвлення реактиву вицвітає протягом 5 хв. Нижня межа чутливості методу 0,3 г/л. Реакцію оцінюють за шкалою стандартів цистину від 0,3 до 0,6 г/л. p align="justify"> Оформлення роботи. Порівняти проби з нормальної і патологічної сечею; за шкалою стандартів цистину визначити приблизний зміст його в сечі хворого пацієнта. p align="justify...
