и протилежні ефекти, залежно від того, які білки проізодітся в клітці. (Fairbrother W.G. et al, 2004)
ингибированного розпізнавання сайту сплайсингу можна різними способами. Коли сайленсери сплайсингу розташовуються близько до сайту сплайсингу або до енхансером сплайсингу, може відбуватися стерическое інгібування. При цьому блокується доступ до snRNP або позитивним регуляторним факторам. Наприклад, поліпірімідін-зв'язуючий білок (PTB; також відомий як PTB1 і hnRNP I), зв'язується з поліпірімідіновим ділянкою і, тим самим, блокує зв'язування U2AF з екзонами. Тканеспеціфічние фактори сплайсингу FOX1 і FOX2, зв'язуючись з інтронів послідовністю, можуть інгібувати формування комплексу E ', запобігаючи зв'язування фактора SF1 з точкою розгалуження. (Bauer J.A. et al, 2009)
Інгібітори сплайсингу можуть стерически заважати зв'язуванню активаторів з енхансером. Сімейство білків Hu/ELAV блокує зв'язування U1. Його дія конкурує з роботою білка TIA1, який взаємодіє з AU-багатою областю, розташованої далі по послідовності в 5 - сайті сплайсінгаекзона 23а нейрофіброматозного типу 1. (Leff SE et al, 1986) FOX1 і FOX2 також інгібують формування комплексу Е, зв'язуючись з Екзонно послідовністю, близько розташованої від ESE, де зв'язуються TRA2 і SRp55. Через це U2AF не може закріпитися. (Chow L.T., Broker T.R., 1978)
Дія цис-регуляторних елементів іноді залежить від позиції регульованого екзона. Кілька білків, наприклад, такі як NOVA1, NOVA2, FOX1, FOX2, hnRNP l, hnRNP l-подібний, hnRNP F і hnRNP H, можуть діяти або як репрессори, або як активатори залежно від положення сайту зв'язування. (Rosenfeld MG et al, 1982)
Позиція сплайсингу може визначати дію чинників сплайсингу. Енхансери можуть розташовуватися таким чином, що, коли фактори сплайсингу зв'язуються з ними, інший екзон краще розташований для дії сплайсосома. Іноді навпаки, елементи сайленсінг змагаються з компонентами сплайсосома або змінюють структуру мРНК, перешкоджаючи пізнанню сайту сплайсингу. (Bauer JA et al, 2009)
5. Біологічне значення сплайсингу
Процеси дозрівання і перетворення РНК надзвичайно важливі для життєдіяльності клітин і цілих організмів.
За допомогою альтернативного сплайсингу можна отримати безліч транскриптів і похідних від них білків. Об'єднання різних сайтів сплайсингу дозволяє генам експресувати кілька різновидів мРНК. Різні варіанти сплайсингу можуть призводити до утворення різних ізоформ одного і того ж білка. Припускають, що в еукаріот альтернативний сплайсинг може бути еволюційним досягненням. Його наявність підвищує ефективність зберігання інформації. Нещодавно було показано, що у приблизно 95% мультіекзонних генів людини спостерігається альтернативний сплайсинг. (Qun Pan et al, 2008)
Геном круглого хробака Caenorhabditis elegans за кількістю генів практично не відрізняється від генома людини, однак альтернативному сплайсингу піддаються тільки 15% генів. Альтернативний сплайсинг дозволяє збільшити різноманітність кодованих геном білків, зберігаючи невелику кількість різних генів в геномі і не створюючи їх надлишкових копій. Різні варіанти альтернативного сплайсингу однієї пре-мРНК можуть здійснюватися в різні періоди розвитку організму і/або в різних тканинах, а також у різних особин одного виду. Альтернативний сплайсинг є ключовим механізмом збільшення різноманітності білків і здійснення системи регуляції експрес?? ії генів, у тому числі тканеспецифической. (Li X., Manley J.L., 2005)
Зміни в процесі альтернативного сплайсингу можуть викликати різні захворювання: нейродегенеративні, серцево-судинні, дихальні захворювання, а також рак і хвороба Альцгеймера. У тканинах, що забезпечують безліч різних процесів, потрібна велика кількість білків для виконання різних функцій. Будь дефект в альтернативному сплайсинге може різко змінити склад білків у клітині. З цієї причини виникають багато неврологічні захворювання. Ці дефекти можуть бути розділені на дві основні групи: первинні і вторинні дефекти сплайсингу.
5.1 Первинні дефекти сплайсингу
При первинних дефектах сплайсингу мутація відбувається в послідовності, яка важлива для правильного його проходження. Багато мутації, що приводять до захворювань, викликані порушеннями в процесі сплайсингу пре-мРНК. Прикладами можуть бути синдром Луї-Бара і нейрофіброматоз. Багато пацієнтів, які страждають цими захворюваннями, несуть мутації, які впливають на проходження сплайсингу пре-мРНК. Дефекти призводять до зміни транскриптов тау-білків, асоційованих з мікротрубочками, - MAPT. Зміни в сплайсинге MAPT можуть призводити до інших захворювань, таким, як хвороба Альцгеймера, м'язова дистрофія, дисфункція глії і дегенерація спинного мозку. ...
