для ін'єкцій.
Окситоцин для ін'єкцій.
Принцип методу і хід визначення див. роботу 1, а, б, тобто
Беруть шість пробірок і вносять у три з них по 5 крапель інсуліну, а в три інші - по 5 крапель окситоцину. Проробляють з ними біуретову, Нінгідринова реакції і реакцію Фоля, як описано в роботі 1, а, б, тобто
Оформлення роботи. Дані занести в таблицю. br/>
Препарати гормоновРеакцііВиявляемая группаРезультат
У висновках відзначити присутність відповідних груп і амінокислот у досліджуваних гормональних препаратах.
Робота 81. Якісні реакції на гормони - похідні амінокислот
Реактиви. Хлорид заліза (III), 0,15 М розчин; сульфанілова кислота, 1%-ний розчин; нітрит натрію, 5%-ний розчин; карбонат натрію, 10%-ний розчин; гексаціаноферрат (III) калію K3 [Fe (CN) 6] 0,2%-ний розчин; гідроксид натрію, 5 М розчин; аскорбінова кислота, кристалічна; азотна кислота, конц.; иодат калію KIO3, 1%-ний розчин; хлороформ.
Обладнання. Штатив із пробірками; очні піпетки; скляні палички; водяна баня; флуороскопа. p align="justify"> Матеріал.
Адреналін, 0,1%-ний розчин в ампулах.
Тиреоїдин, порошок.
а. Реакція на адреналін з хлоридом заліза (III). Метод заснований на здатності пірокатехіновой угруповання адреналіну утворювати з хлоридом заліза (III) комплексне з'єднання смарагдово-зеленого кольору. p align="justify"> Хід визначення. У пробірку доливають 10 крапель розчину адреналіну і додають 1 краплю розчину хлориду заліза (III). Спостерігають появу характерного фарбування. p align="justify"> б. Реакція на адреналін з діазобензолсульфокіслотой. Метод заснований на здатності адреналіну утворювати з діазобензолсульфокіслотой сполука червоного кольору. p align="justify"> Хід визначення. Для отримання діазобензолсульфокіслоти в пробірку наливають по 3 краплі розчину сульфаниловой кислоти і нітриту натрію, перемішують струшуванням. Потім у пробірку додають 5 крапель розчину адреналіну і 3 краплі розчину карбонату натрію. Вміст перемішують струшуванням і спостерігають за розвитком характерного забарвлення. p align="justify"> в. Виявлення адреналіну з освіти флуоресціюючого продукту його окиснення - адренолютіна. Метод заснований на здатності адреналіну окислюватися під дією K3 [Fe (CN) 6] у адренохром, з якого в лужному середовищі утворюється адренолютін, що має жовто-зелену флуоресценцію:
В
Хід визначення. У дві пробірки вносять по 1 краплі вихідного розчину адреналіну і додають в одну з них 5, а в другу 10 мл води. Перемішують скляною паличкою. p> У дві інші пробірки відмірюють по 4 мл розведених розчинів адреналіну, доливають по 0,3 мл розчину K3 [Fe (CN) 6] і залишають стояти 5 хв (при цьому адреналін окислюється в адренохром).
У кожну пробірку додають на кінчику скальпеля кристалічної аскорбінової кислоти і по 4 мл розчину гідроксиду натрію. Соді ржімое перемішують скляною паличкою (аскорбінова кислота перешкоджає подальшому окисленню адренохрома, а гідроксид натрію сприяє перетворенню його в адренолютін).
Пробірки поміщають в штатив флуороскопа і порівнюють інтенсивність характерною флуоресценції в пробах.
р. Виявлення іодтіронінов. Метод заснований на відщепленні при кислотному гідролізі тиреоїдних гормонів (іодтіроніни) иодистоводородной кислоти
Іодтіроніни HIO3
(тироксин, HI + Продукти гідролізу
трііодтіронін) нагрівання
при взаємодії якої з иодата калію виділяється вільний йод:
HI + KIO3 + HNO3? 3I2 + KNO3 + 3H2O
У хлороформі йод має фіолетове забарвлення.
Хід визначення. У пробірку поміщають декілька кристалів тиреоидина, додають 10 крапель концентрованої азотної кислоти і нагрівають 3-5 хв у киплячій водяній бані. Потім доливають 20 крапель розчину иодата калію. Вміст перемішують і охолоджують. p> У пробірку додають 15 крапель хлороформу. Струшують і відзначають характерну забарвлення хлороформу. p> Оформлення роботи. Дані занести в таблицю. p align="justify"> Досліджуваний гормонРеакціяРезультат
У висновку відзначити можливість практичного використання цих реакцій.
Робота 82. Якісні реакції на стероїдні гормони та їх метаболіти
Реактиви. Сірчана кислота, конц.; Гідроксид натрію, 30%-ний розчин; реактив Фоліна; м-дінітробензол, 2%-ний розчин в 96%-ном етанолі. p align="justify"> Обладнання. Очні піпетки; штатив із пробірками; піпетка для концентрованих кислот; водяна баня. p align="justify"> Матеріал. Фолікулін (естрон), 0,1%-ний масляний розчин для ін'єкцій в ампулах. (Для приготування спиртового ...