ового-осадова реакція (сулемовая проба за Грінседту)
Реактиви. 0,1% розчин сулеми (готують з кристалічної сулеми, розчиняючи сіль у гарячої дистильованої воді); 0,85% розчин хлориду натрію. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками, піпетки на 1,0 і 2,0 мл. p align="justify"> Матеріал. Досліджувана сироватка крові. p align="justify"> Метод заснований на здатності сулеми утворювати з мелкодісперснимі білками колоїдний розчин солей ртуті. Порушення дисперсності білкових фракцій сироватки крові викликає осадження грубодисперсних частинок. p align="justify"> Хід визначення. До 0,5 мл негемолізірованной сироватки крові додають 1 мл фізіологічного розчину і титрують 0,1% розчином сулеми з мікробюретки або піпетки ємністю 2 мл. На початку розчин доливають по краплях у швидкій послідовності до початкового утворення помутніння, потім повільно до появи стійкого помутніння. Результати сулемовой реакції висловлюють кількістю мл розчину сулеми, витраченого на титрування. p align="justify"> Розрахунок. Проводять на підставі кількості сулеми, що пішла на титрування досліджуваної проби. p align="justify"> Оформлення роботи. Після визначення величини сулемовой проби з отриманих даних зробити висновок про можливі зміни і причини їх відхилень. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі у здорових людей на титрування йде 1,6-2,2 мл сулеми. p align="justify"> Позитивна проба зустрічається при ряді патологічних станів: захворюваннях печінки (при хворобі Боткіна сулемовая проба становить близько 1 мл, приходячи до норми при одужанні), хронічному нефриті, нефрозі, пневмонії, туберкульозі легень, мієломі, інфекційних захворюваннях і т.д.
Робота 94. Кількісне визначення вмісту заліза у сироватці крові
Реактиви. Трихлороцтової кислота, 20% розчин; уксуснокислий амоній, 70% розчин; насичений розчин сульфату гідразину (2,5 г солі розчиняють в 100 мл води); розчин батофенантроліна *; стандартний розчин *. p align="justify"> Обладнання. Штатив із пробірками; піпетки місткістю на 1,0; 2,0 і 5,0 мл; водяна баня на 100? С; центрифуга лабораторна; фотоколориметр. p align="justify"> Матеріал. Сироватка, що не містить слідів гемолізу. p align="justify"> Метод заснований на здатності бато-фенантроліна в Сульфатовані формі утворювати з іонами двовалентного заліза забарвлений комплекс, інтенсивність якого визначається фотометричним.
Хід визначення. До 2 мл досліджуваної сироватки додають 2,5 мл води, 1,5 мл 20% розчину трихлороцтової кислоти, перемішують і ставлять на 15 хвилин на водяну баню при температурі 90-95? С. Центрифугують 20 хв при 2000 об/хв і відбирають 4 мл надосадової рідини, до якої додають 0,35 мл 70% розчину ацетату амонію і 0,3 мл розчину сульфату гідразину. Суміш фотометрують при довжині хвилі 535 нм в кюветі 10 мм. Потім додають 0,4 мл розчину сульфонованого бато-фенантроліна, залишають стояти на 1 годину, після чого фотометрують при тих же умовах. Фотометрію проводять проти контрольної проби, в яку замість досліджуваної сироватки вносять 2 мл води. p align="justify"> Калібрування проводять так само як і основний досвід, але замість сироватки беруть 2 мл стандартного розчину.
Розрахунок проводять за формулою:
Еоп-1 - Еоп-2
------? 30 (мкмоль/л)
Ек-1 - Ек-2
де Еоп-1 і Еоп-2 - екстинкції дослідної проби до і після збільшення розчину бато-фенантроліна;
Ек-1 - Ек-2 - результати фотометрії калібрувальної проби;
- вміст заліза в калібрувальному розчині, мкмоль/л.
Примітка.
Залізо визначається в сироватці без слідів гемолізу.
Слідкувати за вмістом в дистильованої воді і реактивах, краще використовувати бідистильовану воду.
Посуд слід промивати 5н розчином соляної кислоти і обполіскувати бидистиллированной водою.
При взяття крові на аналіз хворий не повинен приймати препаратів заліза щонайменше протягом 5 днів.
Оформлення роботи. Розрахувати вміст заліза за представленою формулою і зробити висновок його відповідно нормі. p align="justify"> Практичне значення роботи. У нормі вміст негеминового заліза у чоловіків 12-32 мкмоль/л, у жінок - на 10-15% нижче. p align="justify"> Вміст заліза сироватки значно знижується при залізодефіцитній анемії, незалежно від причини її викликає. При запальних, інфекційних, септичних станах, інтоксикації, пухлинах анемії обумовлені не стільки дефіцитом заліза, скільки його недостатнім звільненням з РЕЗ, внаслідок чого знижується синтез гемоглобіну. br/>
2. Біохімічне дослідження сечі
Сеча утворюється і виділяєть...
