дко, при цьому утворюється дігідроксокобінамід, який є неактивною формою кобінаміда.
Розглянемо перетворення, які відбуваються з фруктозою в лужному середовищі. У лужному середовищі фруктоза знаходиться в рівновазі:
Дане перетворення відбувається швидко, при цьому утворюється реакционноспособна енольна форма фруктози.
Таким чином, грунтуючись на вище сказаному можна припустити, що фруктоза в лужному середовищі переходить в енольну форму, яка є активною, і після цього взаємодіє з Cbi (III) (2.2).
Новоутворена форма кобінаміда вступає у взаємодію з гідроксид-іоном за механізмом 2.1. Залишається невідомим лише те, яким чином взаємодіє ця форма кобінаміда з гідроксид-іоном.
Грунтуючись на дослідженнях, які представлені в роботі [43], можна припускати, що взаємодія речовини «А» з ОН- відбувається по внутрішньомолекулярними механізму (2.3).
.4 Кінетика і механізм взаємодії Cbi (II) з фруктозою
Кінетична крива процесу взаємодії кобінаміда (II) і фруктози представлений на рис. 2.12.
Кінетичні криві лінеарізуются в координатах ln (A? -А) - f (t), приватний порядок реакції по Cbi (II) перший (Рис.2.13).
Залежність k набл від концентрації фруктози представлена ??на рис. 2.14.
Отже, механізм реакції описується послідовністю двох реакцій з оборотною першою стадією (2.4) [45].
Рис. 2.12. Кінетична крива відновлення Cbi (II) фруктозою в лужному середовищі; [фруктоза]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; [NaOH]=0,063 моль/л; 23 0 C
Рис. 2.13. Залежність ln (AA?) Від часу для реакції кобінаміда (II) з фруктозою; [фруктоза]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; [NaOH]=0,063 моль/л; 23 0 C.
Рис.2.14. Залежність k набл від концентрації фруктози; [NaOH]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; 23 0 C
Ця залежність нелінійна, але лінеарізуется в координатах 1/k набл - 1/[фруктоза] (рис.2. 15).
Рис. 2.15. Залежність 1/k набл від 1/[фруктоза]; [NaOH]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; 23 0 C.
При малих концентраціях фруктози лімітуючої стадією є утворення інтермедіату Cbi-Фруктоза. При великих концентраціях -перетворення интермедиата в кінцевий продукт.
Для реакцій відновлення Cbi (II) фруктозою при концентраціях NaOH 0,02 М; 0,04 M; 0,063 M; 0,08 M ??були розраховані константи швидкості реакції і отримана їх залежність від концентрації NaOH (рис.2.16.).
рис.2.16. Залежність k набл від концентрації NaOH; [фруктоза]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; 23 0 C.
Дана залежність в координатах k набл - [NaOH] нелінійна, але лінеарізуется в координатах k набл - [NaOH] 2 (рис. 2.17).
Рис. 2.17. Залежність k набл від [NaOH] 2; [фруктоза]=0,1 моль/л; [Cbi]=5? 10 - 5 моль/л; 23 0 C
Це свідчить про те, що приватний Порядок реакції по NaOH другою. Отже, в реакції відновлення Cbi (II) фруктозою бере участь дві гідроксид-іона.
Відомо, що фруктоза має pK=12,03 [46]. Вона здатна взаємодіяти з гідроксид-іоном, при цьому виходить Енолят, який є активною формою фруктози [47]. Для отримання Cbi (I) необхідно утворення проміжного комплексу. У нейтральному середовищі утворення цього комплексу не відбувається, тому ми припускаємо, що він утворюється за рахунок взаємодії Cbi (II) з Енолят. Ця стадія протікає оборотно і швидко. Другий гідроксид-іон бере участь у швидкість лімітуючої стадії - перетворенні кобінамід-енольними комплексу. Ця стадія протікає повільно і необоротно, тому при збільшенні концентрації фруктози швидкість утворення Cbi (I) не змінюється. Таким чином, в процесі утворюється Cbi (I) і продукти окислення фруктози.
З отриманих даних можна зробити наступні висновки. Показано, що швидкість лімітуючої стадією є розпад комплексу Cbi (II) c з'єднанням, одержуваним при взаємодії фруктози з гідроксід- іоном. При цьому доведено, що реакція утворення проміжного комплексу присутній в даному випадку. Встановлено, що в процесі беруть участь два гідроксид-іона; один з них бере участь у швидкість лімітуючої стадії, а інший у швидкій, причому швидкої стадією, мабуть, є взаємодія гідроксид-іона з фруктозою. Таким чином, загальну схему взаємодії фруктози з Cbi (II) можна представити у вигляді (2.5)
2.5 Механізм реакції Cbi (I) з нітритом
При додаванні до Cbi (I) нітриту спостерігалася зміна кольору розчину з коричневого на жовтий (рис. 2.18), що супроводжується зростанням піку при 470 нм і падінням піку при 681 нм, а також дві ізосбесті...
