сk»), аніонних (додецилсульфат натрію, «AppliChem») і неіоногенних ПАР (Тритон Х - 100, Тритон Х - 305, Брідж35, Твін80 фірми «Sigma»). Вміст основної речовини у всіх препаратах ПАР не менее99%. ? -,? -,? - Циклодекстрини фірми «Fluka», вміст основної речовини не менше 98%. Для приготування рухомої фази використовували ацетонитрил хроматографічної чистоти, фірми «Panteac», 99,9% основної речовини. Ацетатно-аміачні буферні розчини готували з 2М і.
Апаратура
Хроматограми реєстрували на рідинному хроматографі «Стаєр» фірми «Аквілон» з флуориметричним детектором. Антибіотики поділяли на ОФ колонці Phenomenex Luna 5u C18 (150? 4.60 мм, 5мкм), забезпеченою предколонкой із захисним картриджем Phenomenex C18, 5мкм при температурі в ізократіческом режимі. Для запису і обробки хроматограм використовували програму «Мультіхром - 2.4». Детектуючий пристрій: джерело порушення-кварцова галогенова лампа з дихроическим рефлектором, фотоелектронний помножувач, діапазон довжин хвиль 200-600 нм.
При вивчення впливу природи і концентрації ПАР, а також циклодекстринів на поділ і чутливість визначення флюмеквіна і ципрофлоксацину в суміші з іншими антибіотиками з'ясували, що серед досліджених ПАР різних класів найкраще розділення і визначення флюмеквіна і ципрофлоксацину досягається в рухомий фазі, яка містить неіоногенний ПАР Тритон Х - 100, який сприяє збільшенню площі хроматографічного піку фторхінолонів в 1,9 раз, а утворення комплексів включення фторхінолонів з? - циклодекстрином збільшує площу хроматографічного піку флюмеквіна і ципрофлоксацину в 2,3 и1, 5 рази і межі виявлення зменшує в 4,2 і 9 разів, відповідно [23].
Показано, що при аналізі спарфлоксацина і моксифлоксацину методом ВЕРХ, додавання в рухому фазу іон парного реагенту істотно підвищує ефективність колонки і симетричність піків аналізованих сполук. Встановлено, що в умовах обращенно фазової ВЕРХ оптимальні значення хроматографічних параметрів спостерігаються в рухомій фазі ацетонитрил вода при температурі колонки 40 Розроблені методики можуть бути використані при аналізі субстанцій та лікарських препаратів спарфлоксацина і моксифлоксацину по розділах нормативної документації «справжність» і «кількісне визначення» [14 ].
3.3 Застосування ВЕРХ в аналізі протипухлинних антибіотиків
Доксорубіцин - антибіотик широкого спектру дії. Він є антибіотиком антрациклінового ряду і має протипухлинну дію.
Згідно ВФС 42-1796-88, зміст доксорубіцину визна чають мікробіологічними методом дифузії в агар з ис користуванням тест-культури Bac.cereus var. mycoides 537 (спо ри), який відрізняється великою трудомісткістю, тривало стю і неспецифічністю. Через недоліки мікробілогіческого методу, доксорубіцин визначали за допомогою високоефективної рідинної хроматографії.
Під час експериментальної частини, брали до уваги результати дослідження хроматографічної активності доксорубіцину в тонких шарах нормальнофазного (пластини «Silufol UV - 254») і обращеннофазного (пластини «Silufol UV - 254», оброблені вазеліновим маслом ) сорбентів із застосуванням рухливих фаз різної полярності, в якості нерухомої фази використан Чи обращеннофазний сорбент «Новопак Т - 18», а як елюент - систему розчинників ізопропанол-ацетатний буфер (рН=4,5) у співвідношенні 3:7 (по об'єк йому). Визн...
