спирту и сильно перемішують, струшуючі течение 1 хвилини, відокремлюють спиртовий куля и фільтрують. Тіохром, отриманий в результате окислення тіаміну, обумовлює синю флуоресценцію.
. Тіамін дает осдкіз Деяк загально алкалоїднімі реактивами, например з реактивом Драгендорфа (пікрінова кислота не дает облогу).
Кількісне визначення.
. После нейтралізації (по бромтимолового синьому) тіамін-бромід візначається аргентометрічно.
. Другий метод підстав на Властивості вітаміну В 1 утворюваті з диазотированного пара-аміно-ацетофенон з'єднання фіолетово-червоного кольору, Пожалуйста нерастворимо в воде, з багатьма органічнімі Розчинник утворює кольорові розчини, что допускаються порівняння з ЕТАЛОН Розчин. З органічніх розчінніків застосовують звічайна ксилол або толуол.
Д?? я визначення тіаміну, розчіненого в однорідному безбарвному Розчинник, немає необхідності вітягаті кольорове з'єднання з Розчин. У ціх випадка додаються ізопропанол в кількості, достатній для розчінення кольорового сполуки, и проводять визначення по стандартному Розчин.
Для АНАЛІЗУ беруть таку Кількість препарату, в якому містіться 100 мікрограмів (0,0001 г) тіаміну. Еталон готують розчіненням 50 мг вітаміну Вх (точне зважування) в 500 мл 50% за об ємом) етанолу, Який містіть 1 краплю 4 н. соляної кислоти. Хоча цею ЕТАЛОН розчин можна зберігаті при кімнатній температурі течение декількох місяців, воліють все ж готувати его на Термін НЕ более 1 місяця. Крім ЕТАЛОН Розчин заготовляються: 1) 0,03% -ного Розчин пара-аміно-ацетофенон в 0,2 н. соляній кіслоті; 2) 0,1% -ний розчин нітріту натрію; 3) 1 н. и 2,5 н. розчини їдкого натру; 4) 50% -ний етанол (за об ємом); 5) толуол; 6) ізопропанол і 7) 4 н. соляну кислоту.
Для Приготування реактиву під Назв діазораствор А в невелікої склянці змішують 10 мл Розчин пара-аміно-ацетофенон і 2 мл Розчин нітріту натрію и охолоджують НЕ менше 2 хвилин в кріжаній воде. Перед користувань до суміші додаються 3 мл 1 н. Розчин їдкого натру и збовтують. Реактив під Назв діазораствор Б готують так само, як и розчин А, з тією лишь різніцею, что вместо 1 н. Розчин їдкого натру до Розчин Б додаються 2,5 н. Розчин їдкого натру.
Випробування ампульний розчин змішують з такою кількістю перегнанной води, щоб КОЖЕН мілілітр суміші містів около 100 мікрограмів тіаміну. У калібровану пробірку на 10 мл влівають 1 мл суміші, додаються 2 мл 50% -ного етанолу и поміщають у водяну баню при температурі 60 °. Через 1 хвилину долівають 1 мл діазораствора А, сильно збовтують І знову залішають в лазні на 2- - 3 хвилини. Потім суміш охолоджують, додаються 1 краплю 4 н. соляної кислоти и ізопропанол до Мітки, збовтують и порівнюють в колоріметрі з Контрольний розчин, виготовленя змішанням 1 мл води з 1 мл ЕТАЛОН Розчин тіаміну, 1 мл 50% етанолу та 1 мл діазорозчіну А за методом, опис вищє.
. Для визначення Вітамін В1 по ІНШОМУ методу розчіняють 0,4-1,5 мг его в 10 мл води, додаються 0,5 мл реактиву з фосфорно-Вольфрамат и 0,4-0,6 мл 10% -ного Розчин їдкого натру. З являється синє забарвлення. Тітрують 0,002 н. Розчин червоної дах яної СОЛІ, 1,82 мл которого відповідає 1 мг вітаміну В 1 до знікнення синього забарвлення.
Реактив готують так: 10 г вольфрамату натрію розчіняють в 75 мл води, додаються 8 мл 85% -ної фосфорної кислоти и слабо нагрівають течение 2 годин. Если розчин зеленіє, додаються немного бромної води после нагрівання течение зазначену годині и надлишок брому відаляють кіп'ятінням. За охолодженні що доводять до 100 мл.
2.2 Вітамін В 2
Якісні Реакції.
. 0,001% -ний розчин (1 мг: 100) рібофлавіну - блідого зеленувато-жовтого кольору в Світлі, что з інтенсівної жовтувато-зеленою флуоресценцією, знікаючої від Додавання мінеральних кислот або лугів.
. При відновленні цинком в ОЦТОВОКІСЛОГО або солянокислом розчіні рібофлавін переходити в лейкофлавін, прієднуючі 2 атоми водний.
Кількісне визначення.
. Безпосередно колоріметрування жовтих розчінів рібофлавіну.
. По азоту. До 0,3 г рібофлавіну (точне зважування), Попередньо висушеності течение 18 годин на вакуум-ексікаторі над сірчаною кислотою, в кьельдалевской колбі додаються 1 г бензойної кислоти и визначаються вміст азоту, руйнуючі суміш НЕ менше 5 годин. Вміст азоту винне буті НЕ менше 14,5% и не более 15,2%.
2.3 Вітамін В6
Якісні Реакції.
. З фосфорно-вольфрамового кислот адермін утворює нерозчінне з'єднання (облог).
. З хлорні залізо...
