3,1кафтарова кіслота47,9656,7каутарова кіслота45,1627,8п-кумарова кіслота0,47,8кверцітін - 3-О-глікозід16,9291,7Кверцітін9,5219,4дельфінідін - 3,5-О-діглікозід0,30,8ціанідін - 3,5-О-діглікозід0,64,2петунідін - 3,5-О-діглікозід1,76,8дельфінідін - 3-О-глікозід1,07,6пеонідін - 3,5-О-глікозід3,611,8мальвідін - 3,5-О-діглікозід9,040,9ціанідін - 3-О-глікозід0,32, 4петунідін - 3-О-глікозід1,310,0пеонідін - 3-О-глікозід0,95,9мальвідін - 3-О-глікозід7,247,1дельфінідін - 3-О- (6 -ацетіл-глікозід) 2,638,9ціанідін - 3-О- (6 -ацетіл-глікозід) 0,34,3петунідін - 3-О- (6 -ацетіл-глікозід) 0,23,5дельфінідін - 3-О- (6 -п-кумароїл-глікозід) 0,53,9пеонідін -3-О- (6 -ацетіл-глікозід) 0,58,9мальвідін - 3-О- (6 -ацетіл-глікозід) 0,44,3ціанідін - 3-О- (6 -п-кумароїл-глікозід)? 1,4петунідін - 3-О- (6 -п-кумароїл-глікозід) 0,36,6пеонідін - 3-О- (6 -п-кумароїл-глікозід) 0,11,1мальвідін - 3-О- (6 -п-кумароїл-глікозід) 0,811,7
Концентрат ПК отримувалася упарюванням 600 мл червоного вина на роторному віпарювачі Laborota +4001 («Heidolph», Німеччина) при температурі 40? З та тиску 0,8-0,9 кг/см 2.
Отримання концентрат про ємом 30 мл вітрімувалі течение тижня у холодильника при температурі +4? С для віпадання в облог нерозчініх у водному розчіні поліфенольніх Сполука. Надосадову рідіну відбіралі (розчин 1), а до облогу, Який Віпа вносили 20 мл 70% водного Розчин етилового спирту (отриманий во время упарювання вина) для екстракції поліфенольніх Сполука. Через 12 годин рідку фракцію збирать в окремий посуд (розчин 2), а твердий Залишок відкідалі. Внаслідок про єднання розчінів 1 і 2 здобули препарат про ємом 50 мл [19].
Загальний вміст поліфенолів БУВ Стандартизований у віні та отриманий концентраті за галів кислотою еквівалентно з використанн реактиву Фоліна-Чокальтеу.
Масова концентрація фенольних Сполука у досліджуваному препараті становила 59 г/л, зокрема, полімерних Сполука - 40 г/л, мономерів - 19 г/л. Якісний та кількісній склад концентрату ПК визначавши методом вісокоефектівної рідінної хроматографії. Основні компоненти представлені кафтаровою, каутарова та галів кислотами, Кверцитин та катехінамі (табл. 2.1) [22].
2.4 опромінення піддослідніх тварин
Щурів піддавалі Загально одноразовому опроміненню в дозах 10 та 30 сГр на установці РУМ - 17 з такими параметрами: шкірно-фокусна відстань 95 см, напряжение 130 кВ, Сила Струму 10 мА, фільтри Cu 0,5 мм та Al 1,0 мм, Потужність дозуюч - 8,3 мГр · с - 1.
Дозу опромінення контролювалі клінічнім дозиметром типом 27012 (Otto Sh? n, Німеччина).
2.5 Забір крови та зразків тканин
На 24, 48, 72 та 168 години после Дії радіації щурів ефірнім наркозом вводили в хірургічну стадію. Забір зразків проводили после декапітації тварин.
Відбіралі вісхідну, дугу аорти та ее грудну часть, корково куля правої нирки. Віділені тканини та лейкоцитів Одразу ж заморожувалі при - 70 ° С.
Кров збирать у фарфорові чашки. Як антикоагулянт вікорістовувалі гепарин (кінцеве розведення гепарин: цільна кров=1: 100).
2.6 Віділення лейкоцітів [15]
Готувалі розчин фікол-тріомбрасту змішуванням 9,677 г фіколу (Picolle - 400, Farmacia raquo ;, Швеція), 122,5 мл дістільованої води та 20 мл 76% тріомбрасту ( Фармон raquo ;, Україна) для Отримання суміші Густин 1,076-1,078 г/см 3.
У Центрифужний пробірку вносили суміш фікол-тріомбрасту, на якові Обережно нашаровувалі 5-7 мл крови, розведеної забуферованого фізіологічнім Розчин (ЗФР, рН 7,4, складом 8,5 г NaCl; 0,22 г KCl; 1,071 г Na 2 HPO 4; 0,2 г KH 2 PO 4). Центріфугувалі 30 хвилин при 1000 об./Хв. После центрифугування з пробіркі віббіралі лейкоцити, Клітини двічі відмівалі у ЗФР впродовж 5 хв при 1500 об./Хв. Надосадову рідіну відбіралі, отрімані лімфоцити Розвода у ЗФР.
2.7 Підрахунок кількості лейкоцітів у камері Горяєва [25]
До 20 мкл Розчин 0,05% метиленового зеленого, приготовані на 3% оцтовій кіслоті (CH 3 COOH лізує еритроцити, а метиленовий синій фарбує ядра лейкоцітів), додавали 20 мкл суспензії лейкоцітів, суміш ретельно
перемішувалі. Заповнювалі нею камеру Горяєва, Залишани ее на 1-2 хв в горизонтальному положенні для осідання лейкоцітів. Лейкоцити підраховувалі в двадцяті великих квадратах.
Розрахунок кількості лейкоцітів проводили за формулою:
хзаг =,
де Х - концентрація клітін, млн./мл.
2.8 Отримання лізатів лейкоцітів та зразків тканин
Гомогенізацію заморожених...
