Курсова робота
Методи ПЛР в діагностиці онкологічних захворювань
Зміст
Позначення та скорочення
Введення
Глава 1. Сутність і Принципи методу ПЛР
1.1 Застосування методу ПЛР
1.2 Переваги і недоліки методу ПЛР
1.3 Різновиди ПЛР
1.4 Mеханизм ПЛР. Стадії постановки ПЛР
Глава 2. Онкомаркери в клінічній діагностиці
2.1 Алгоритм дослідження на онкомаркери
Висновок
Список використаних джерел
Позначення та скорочення
ПЛР - полімеразна ланцюгова реакція;
УПФ - умовно-патогенна флора;
ДНК - дезоксирибонуклеїнова кислота;
дНТФ - дезоксінуклеотідтріфосфат;
дЦТФ - дезоксіцітозінтріфосфат;
дТТФ - дезоксітімідінтріфосфат;
ІФА - імуноферментний;
ИЛА - іммунолюмінесцентний;
РІА - радіоімунний;
ЯМР - ядерний магнітний резонанс;
АФП - альфа-фетопротеїн;
РЕА - раково-ембріональний антиген;
СА - раковий антиген;
МСА - муціноподобний асоційований антиген;
? - ХГ - Бета-хоріонічний гонадотропін; - антиген плоскоклітинної карциноми;
ПСА - Простатичний специфічний антиген;
СПСА - Вільний простатичний специфічний антиген; - нейронспецифічна енолаза; - Фрагмент цитокератину;
ВТА - Пухлинний антиген сечового міхура;
ОМ - онкомаркер; - міжнародна класифікація стадій злоякісних новоутворень.
Введення
Досягнення генетики та молекулярної біології останніх десятиліть справили величезний вплив на розуміння природи ініціалізації і прогресії злоякісних утворень. Остаточно встановлено, що рак являє собою гетерогенну групу захворювань, кожна з яких викликається комплексом генетичних порушень, що визначають властивість неконтрольованого зростання і здатність до метастазування. Ці сучасні знання відкрили принципово нові можливості в діагностиці та лікуванні злоякісних новоутворень [1].
ДНК-діагностика - це один з найбільш сучасних високотехнологічних методів дослідження. ДНК-аналізи широко застосовуються в діагностиці інфекційних захворювань, дозволяючи виявляти навіть поодинокі мікроорганізми в організмі людини [10].
ДНК-діагностика об'єднує кілька методів дослідження, найпоширеніший з них - метод ПЛР (полімеразної ланцюгової реакції, Polymerase chain reaction, PCR diagnostics) [6].
Винахід ПЛР К.Муллісом і його співробітниками в 1985 році революціонізіровал молекулярну біологію та молекулярну медицину. До цього в історії медицини лікарі не мали такого швидкого, ефективного, і головне високоточного методу ранньої діагностики різних захворювань. Даний метод широко поширений в сучасному світі, має велику кількість переваг і володіє високою точністю. Широке впровадження в область практичної охорони здоров'я ПЛР обумовлено простотою її виконання, низькою собівартістю і надійністю. Разом з тим, сьогодні вже очевидно, що подальший розвиток ПЛР отримає в області кількісного визначення нуклеїнових кислот (ДНК і РНК) інфекційних агентів [5].
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР, PCR - polymerase chain reaction) - сучасний метод клінічної лабораторної діагностики, що імітує природну реплікацію ДНК і дозволяє виявити єдину специфічну молекулу ДНК у присутності мільйонів інших молекул. Метод заснований на багаторазовому виборчому копіюванні певної ділянки ДНК за допомогою ферментів в умовах in vitro. При цьому відбувається копіювання тільки тієї ділянки, яка задовольняє заданим умовам, і тільки в тому випадку, якщо він присутній в досліджуваному зразку. На відміну від ампліфікації ДНК в живих організмах, (реплікації), за допомогою ПЛР амплифицируют відносно короткі ділянки ДНК. У звичайному ПЛР-процесі довжина копійованих ДНК-ділянок становить не більше 3000 пар основ. Перш можна було отримати тільки мінімальні кількості специфічного гена, тепер із використанням ПЛР навіть одинична копія може бути ампліфікувати до мільйона копій за кілька годин [7].
Методика ПЛР стала необхідною для багатьох звичайних процедур, таких як клонування специфічних фрагментів ДНК, виявлення та ідентифікація генів в діагностиці і в судовій медицині, а також у процесі ...
