> 2) Способи осадження денатурованого білка
Щоб осадити білок з розчину, треба позбавити його обох факторів стабілізації: і заряду, і гідратної оболонки.
ОСАДЖЕННЯ Нативні БІЛКІВ
Щоб зберегти Нативні білкової молекули, її заряд можна усунути тільки одним способом: наблизити рН середовища до ізоелектричної точці білка (ВЕТ), а для більшості білків нашого організму ВЕТ знаходиться в слабокислою середовищі. Інший фактор стабілізації - гідратну оболонку можна усунути різними способами.
Найбільш типовим прикладом осадження нативного білка є Висолювання.
а) Висолювання - це осадження білків високими концентраціями нейтральних солей лужних і лужноземельних металів, оскільки такі солі дуже гідрофільних і володіють у високих концентраціях водовіднімаючих властивостями. Частіше це NaCl, Na 2 SO 4 , (NH 4 ) 2 SO 4 , CaCl 2 . У міру додавання таких солей до розчину білка вони спочатку розчинявся у вільній воді, а потім, при подальшому підвищенні концентрації солі, конкурують з білком за володіння водою, яка входить до складу гідратних оболонок. Білки менш гідрофільні, які погано утримують воду гідратної оболонки, втрачають її раніше. Більш гідрофільні білки вимагають більшої концентрації солі для висолювання. Тому за допомогою висолювання можна розділити білки з різним ступенем гідрофільності. Таким способом, наприклад, можна розділити альбуміни і глобуліни плазми крові.
При Висолювання зберігається Нативні білкових молекул. Якщо осадити білки за допомогою висолювання, а потім зменшити концентрацію солей, наприклад, методом діалізу, то білок знову розчиниться .
Осадження білків без втрати ними нативні можна досягти також за допомогою водовіднімаючих засобів.
б) ЗАСТОСУВАННЯ Водовіднімаючих ЗАСОБІВ . Такими засобами є розчинники, які змішуються з водою в будь-яких співвідношеннях. Найчастіше це ацетон, етиловий спирт . Ці речовини віднімають гідратні оболонки білків, і білки випадають в осад, якщо вони позбавлені заряду. Але, на відміну від висолювання, осад відразу (немедленно!) повинен бути відділений від розчинника. Якщо розчинник і білок будуть довго перебувати у контакті, то можуть статися безповоротні зміни структури білкової молекули (Денатурація). br/>
ОСАДЖЕННЯ Денатурованого БІЛКІВ
а) ДІЯ СОЛЕЙ ВАЖКИХ МЕТАЛІВ . Утворюють сполуки з SH-групами білків. Отруйні для людини і тварин. У медичній практиці застосовуються способи детоксикації при отруєннях важкими металами. У цих випадках для знешкодження цих металів дають всередину молоко або інші білкові розчини.
б) КИП'ЯТІННЯ (або просто нагрівання до високих температур) - посилюється тепловий рух молекул, послаблюються слабкі типи зв'язків, вт...
