наприклад, томатного або фруктового соку або знятого молока. Патогенні мікроорганізми потребують в сироватці крові, бактерії рубця - в рідині з нього. Більшість молочнокислих бактерій вирощують на молоці. Середовища певного складу для тих же бактерій повинні містити приблизно 40-50 хімічних сполук, включаючи більшість амінокислот, вітамінів і мікроелементів.
Додаткові компоненти середовищ,
такі як буфер і агар, що не використовуються бактеріями в якості поживних речовин.
Для підтримки на потрібному рівні рН в середовища додають той чи інший буфер, найчастіше фосфатний (РК2 = 7), бікарбонат/ССЬ (рК ' 1 = 6,3) або буфер на основі карбонової кислоти (оцтової, янтарної або лимонної - рК від 3,1 до 6,4) або білків (рК 7,0). При використанні для буфера природних органічних сполук слід враховувати, що вони не повинні споживатися бактеріями. Широко застосовуються для добавки в середу синтетичні буфери, такі як Тріс або В«Good!В» (цвіттер-іони органічних сульфонового кислот). Необхідно мати на увазі, що далеко не всі буфери інертні - їх компоненти мо-жуть утворювати або комплекси з іонами двох і тривалентних металів, або нерозчинні опади, взаємодіючи з компонентами середовища, а також служити поживними речовинами для вирощуваних мікроорганізмів; фосфат значною концентрації пригнічує ріст багатьох бактерій.
Для отримання щільного середовища, в рідкий живильний розчин додають агар (0,8% для полужидкой середовища, 1,5-2,0%-для щільної). Агар - це полісахарид складного складу, одержуваний з морських червоних водоростей; він плавиться при температурі 90 В° С і після розплавлення застигає при температурі 45 В° С. Середовища для бактерій, що ростуть при екстремально високій температурі, високих концентраціях солей або низьких значеннях рН або здатних розріджувати агар, ущільнюють силікагелем. Це неорганічна сполука застосовують також для отримання щільного середовища, якщо необхідно визначити здатність бактерії до автотрофного зростанню.
3.4.Для вирощування чистих культур мікроорганізмів необхідна стерилізація середовищ і інструментів
Стерилізацією називають звільнення якого об'єкта від будь-яких живих організмів. Нижче коротко описані методи стерилізації і зазначені області їх застосування.
Автоклавування.
Живильні середовища і жаропрочное устаткування зазвичай стерилізують текучою парою в автоклаві -15 хв при 121 В° С. Такий обробки достатньо для того, щоб знищити клітини і спори бактерій (Необхідно пам'ятати, однак, що деякі екстремофіли можуть виживати навіть при цих умовах). Зазначена температура досягається в автоклаві при тиску насиченої водяної пари 2 атм. (0,2 МПа). Якщо в стерилізаційної камері є повітря, цьому тиску відповідає більш низька температура. Щоб встановити необхідний температурний режим стерилизаций, повітря з камери, перш ніж її герметизувати, витісняю...
