трібного розміру;
д) пластину поміщають шаром вниз на плівку над пробою і, замінюючи вакуум легким тиском, переносять на неї пробу.
Цей метод дозволяє нанести на пластину одночасно декілька зразків без їх попереднього розчинення і концентрувати розбавлені проби.
Істотним є сталість відстані лінії нанесення проб від нижнього краю пластини і лінії занурення пластини в елюент.
Способи проведення ТШХ
Лінійна, кругова і антікруговая ТШХ. У колонкової рідинної хроматографії можливе тільки лінійне рух елюенту. У ТШХ завдяки відкритому шару сорбенту можна здійснити три типи елюювання: лінійне, кругове і антікруговое (рис. 4). Крім того, в ТШХ можна реалізувати додатково різні методики, що дозволяють значно збільшувати пікову ємність.
Найбільш широко використовують лінійний розвиток хроматограм. Проби наносять на стартову лінію паралельно одній із сторін пластини. Пластину поміщають вертикально в хромато-графічну камеру, на дно якої налитий елюент, і проводять висхідну ТШХ. У лінійній ТШХ зі збільшенням R f , речовини розмивання збільшується. Лінійне розвиток хроматограмм можна здійснити і при горизонтальному положенні пластини
В
Рис. 4. Типи елюювання в ТШХ: а - лінійне, б - лінійне (Горизонтальне); в - кругове; г - антікруговое з подачею на неї елюенту з одного або з обох сторін.
Для висхідній лінійної ТШХ в якості хроматографічної камери можна використовувати будь-яку посудину прямокутної або циліндричної форми. Проте в таких камерах важко отримати відтворювані результати, так як у міру підняття елюенту по пластині відбуваються фронтальне поділ елюенту в шарі сорбенту (Полізонального ТШХ), адсорбція і капілярна конденсація компонентів елюенту з парової фази на суху частину пластини та інші процеси. У подібних камерах, можна проводити ТШХ з насиченням (стінки камери покривають фільтрувальної папером, змоченою елюентом) або без насичення.
Для зменшення впливу парової фази в лінійній ТШХ використовують В«сендвічВ»-пластини. З трьох сторін двох пластин знімають тонкий шар сорбенту і, проклавши між ними прокладку (товщина 0,5-2 мм), щільно скріплюють такий В«сендвічВ»-затискачем і опускають в камеру з елюентом. ТШХ проводять, таким чином, одночасно на двох пластинах, розташованих шаром один до одного. В якості другої пластини можна використовувати, скляну підкладку без шару адсорбенту.
У кругової ТШХ проби наносять на деякій відстані від центру пластини по окружності, а елюент подають до центру (рис. 4, б). Оптимальний дозвіл досягається кругової хроматографією при К '= 100 (R f = 0,009), тобто добре розділяються речовини з низькими значеннями R f . p> У антікруговой ТШХ проби наносять по колу по периферії пластини і елюент подають у напрямку до центру пластини (рис. 4, г). При цьому хроматографічні зони зменшуються у міру руху по пластині. У антікруговой ТШХ одночасно можна аналізувати найбільшу ...