вибір стандартного речовини ускладнюється, але в будь-якому випадку слід використовувати з'єднання, що відповідають умові:
К1 lt; Кст lt; Кn. (10)
Запропонований алгоритм прогнозування систематичних похибок був застосований при розробці та оптимізації методики визначення сумарного вмісту амінокислот у яблучних соках (таблиця 11).
Таблиця 11 - Оцінка систематичної похибки вибору речовини-стандарту
? · 10-4piСок1Сок2с, моль/лRipi · Riс, моль/лRipi·Ri1,281,000,00090,02030,020,00130,03120,031,120,870,00060,01360,010,003750,09010,081,230,960,00140,03160,030,00260,06240,061,040,810,00150,03390,030,00230,05520,041,461,140,00120,02710,030,00120,02880,030,960,750,00100,02260,020,00140,03360,031,451,130,00070,01580,020,000090,00220,001,090,850,00060,01360,010,00310,07440,061,020,800,00190,04290,030,00020,00480,001,020,800,00130,00000,000,00150,00000,001,230,960,003680,08310,080,00750,18010,171,421,110,00300,06780,080,00850,20410,231,130,880,00240,05420,050,00210,05040,041,321,030,00360,08130,080,00290,06960,071,311,020,01260,28460,290,00330,07930,081,150,900,00920,20780,190,00140,03360,03
Відносна систематична похибка використання в якості речовини-стандарту треоніну становить 3%.
2.6 Методика визначення амінокислот
Пробу об'ємом 0,10-1,00 см3 поміщають в пробірку зі шліфом, додають 0,60 см3 1% розчину нингидрина, приготованого на фосфатному буфері pH 6,86, додають 0,45см3 0,2 % розчину аскорбінової кислоти і доводимо дистильованою водою до обсягу 3,00см3. Пробірки нещільно закривають скляними пробками для виходу пари. Нагрівають на киплячій водяній бані протягом 30 хвилин, після чого швидко охолоджують до температури 20? C. Після охолодження в пробірки вносять по 10,00 см3 дистильованої води, закривають пробками, інтенсивно струшують і вимірюють оптичну щільність досліджуваного розчину щодо дистильованої води в кюветах товщиною поглинаючого шару 10 мм на спектрофотометрі при? =568 нм.
2.7 Побудова градуювального графіка
Для побудови градуювального графіка була обрана амінокислота треонін. Попередньо оцінена систематична похибка використання треоніну в якості речовини-стандарту. Вона склала 3%. При оптимізованих умовах проведення реакції треоніну з 1,0% розчином нингидрина в присутності аскорбінової кислоти була вивчена залежність светопоглощения продукту реакції від концентрації треоніну (малюнок 10).
Рисунок 10 - Залежність аналітичного сигналу фіолетового Руеманна від концентрації треоніну
Встановлено, що продукт взаємодії треоніну з розчином нингидрина підкоряється закону світлопоглинання Бугера-Ламберта-Бера в діапазоні концентрацій від 1,0477 до 10,4755 мкг/мл.
Якісну характеристику розроблюваної методики межа виявлення розраховували за формулою [49].
Сmin=(11)
де t- коефіцієнт Стьюдента;-;-;-; a -; n -;
СminP - межа виявлення, мкг/мл. Мінімальна концентрація, яку можна визначити при вибраній довірчій ймовірності 0,95, дорівнює 0,07 мкг/дм3.
2.8 Аналіз соків
Правильність запропонованої методики перевіряли методом «введено-знайдено». Були проаналізовані зразки яблучних соків, придбані в торговельній мережі: «На Здоров'я», «Сади Придонья», «Добрий», «Агуша», «Фруто-Няня», «Нікітіна Садиба» і соковмісного напою «Живчик» без добавки і з добавкою стандартного розчину треоніну (таблиця 12).
Таблиця 12 - Перевірка правильності методики методом «введено-знайдено» (n=6, P=0,95)
Назва сокаТехнологія проізводстваВведено, мкг/млНайдено, мкг/мл ±? На ЗдоровьеПрямого віджиму - 2,62 3,272,41 ± 0,02 5,14 ± 0,10 5,72 ± 0,18Сади ПрідоньяПрямого віджиму - 2,621,79 ± 0,02 3,93 ± 0,10ДобрийВосстановленний - 2,621,71 ± 0,03 4,32 ± 0,06АгушаВосстановленний - 2,621,67 ± 0,02 4,00 ± 0,06Фруто-НяняКонцентрірованний - 2 , 69 3,272,27 ± 0,02 4,79 ± 0,04 5,80 ± 0,04Нікітіна УсадьбаКонцентрірованний - 2,62 3,272,30 ± 0,09 4,89 ± 0,02 5,74 ± 0,12ЖівчікСокосодержащій -1,962,36 ± 0,01 3,95 ± 0,05
Похибка визначення проаналізованих соків знаходиться в діапазоні від 0,4 до 11%.
Для зразків соків відновленого і концентрованого в межах похибки експерименту отримані ідентичні значення. Різницю між сумарною концентрацією амінокислот у перерахунку на треонін для соків прямого віджиму можна пояснити неповним дотриманням умов технологічного процесу.
2.8 Метрологічна оцінка показників якості розробленої методики
Розробка методики аналізу передбачає встановлен...
