сло проціджують через вату, потім фільтрують через паперовий фільтр. Таке сусло містить 10- 20% цукру. Визначивши його зміст по щільності розчину за допомогою цукрометра, сусло розбавляють водою до концентрації цукру 6-8%, стерилізують при 115 ° С (тиск 0,5 атм) протягом 30 хв. Готове сусло можна отримати на пивоварному заводі. Сусло-агар. До приготовленого суслу додають 2,5-3% агару, кип'ятять до його розплавлення, фільтрують через вату і стерилізують таким же способом, як пивне. Знежирене молоко. Для приготування поживних середовищ вживають зняте молоко, так званий обрат (жир в молоці несприятливо впливає на ріст деяких мікроорганізмів).
Обрат отримують сепаруванням молока, нагрітого до 34 ° С. Жир можна видаляти і при відстоюванні молока. При стерилізації молока слід враховувати, що його не можна тривалий час витримувати в автоклаві, оскільки лактоза (молочний цукор), що міститься в молоці, може карамелізований. Знежирене молоко розливають у стерильні пробірки і витримують при 115 ° С (тиск 0,5 атм) 15 хв. Перед стерилізацією кислотність відвійок не повинна перевищувати 22 ° Тернера, інакше молоко згорнеться. Після стерилізації його витримують три доби в термостаті при 30 ° С, щоб спровокувати розвиток спороутворюючих та інших стійких до нагрівання форм. Через 3 дні кожну пробірку з молоком переглядають і пробірки, в яких розвинулися мікроорганізми, вибраковують. При стерилізації в автоклаві іноді спостерігається побуріння молока внаслідок карамелізації молочного цукру і пептонізаціі казеїну. При тривалій стерилізації на дно пробірки випадає осад казеїну, який може частково пептонізіроваться. Перегріта побурілу молоко в якості середовища використовувати не можна.
Дріжджові середовища. Дріжджова вода. 50-100 г сухих дріжджів розмішують в 1 л води, кип'ятять 10 хв, фільтрують через паперовий фільтр і стерилізують текучою парою по півгодини протягом трьох днів щодня. Дріжджовий автолізат. 200 г пресованих дріжджів розводять в 1 л води, додають 2 г Na2HPO4, 1 н. розчин NaOH (до рН 6,1) і 5 мл хлороформу, витримують при 37 ° С дві доби, доводять до рН 7,4, кип'ятять 30 хв, фільтрують через паперовий фільтр, розливають в посуд і стерилізують при 115 ° С півгодини. Дріжджовий екстракт. 1 кг пресованих дріжджів розводять в 1 л води, суміш кип'ятять 1 год, тричі відфільтровують через паперовий фільтр і стерилізують при 115 ° С 30 хв.
2. Приготування різних поживних середовищ
2.1 Джерела елементів, використовувані для приготування поживних середовищ
У питанні про джерела зазначених у таблиці 2 слід відзначити особливу роль води. Вода становить 80 - 90% від клітинної маси мікроорганізмів і відіграє найважливішу роль в їх фізіологічних функціях. Вона входить до складу структурних елементів клітини, служить середовищем для біохімічних реакцій, джерелом кисню в процесах метаболізму, безпосередньо бере участь у метаболічної реакціях, наприклад в реакціях гідролізу.
Будучи хорошим розчинником, вода забезпечує надходження поживних речовин у клітину.
У відсутності вологи сповільнюються або повністю припиняються процеси життєдіяльності мікроорганізмів. Залежно від ступеня чутливості до цього фактору деякі з них переходять у стан анабіозу, інші гинуть.
Наголошується, що стійкість до відсутності вологи у кулястих і грампозитивних бактерій вище, ніж у паличковидних і грамнегативних.
Таблиця 1 Основні фізіологічні функції найважливіших елементів
ЕлементФізіологіческая функціяУглеродВходіт до складу всіх органічних речовин клеткі.КіслородВходіт до складу води, органічних речовин клітини; у вигляді О2 є акцептором електронів при аеробному диханіі.АзотВходіт до складу білків, нуклеїнових кислот, коферментов.ВодородВходіт до складу води і всіх органічних речовин клеткіФосфорВходіт до складу нуклеїнових кислот, фосфоліпідів, коферментів, бере участь у процесі дихання (освіта АТФ) СераВходіт до складу білків (в амінокислоту цистеїн і метіоніні) і деяких коферментів (КоА, кокарбоксилази та ін.). КалійОдін з головних неорганічних катіонів клітини, кофактор для деяких ферментов.КальційВажний катіон клітини, кофактор для деяких ферментів (наприклад, протеїназ) .МагнійВажний катіон клітки; неорганічний кофактор для багатьох ферментативних реакцій, в тому числі для реакцій за участю АТФ; бере участь у зв'язуванні ферментів з субстратамі.ЖелезоВходіт до складу цитохромів та інших білків, кофактор для деяких ферментов.МарганецНеорганіческій кофактор для деяких ферментів, іноді може замінити магній.КобальтВходіт в вставши вітаміну В12 і його похідних, явлющіхся коферментамі.Медь, цинк, молібденНеорганіческіе компоненти деяких ферментів.
Джерела вуглецю та азоту
Для пере...
