від 2. Вплив температури на активність сичужного ферменту
У три пробірки налити по 2 мл 0,1%-ного розчину сичужного ферменту. Вміст першої пробірки закип'ятити. Потім всі три поставити в холодну волові, наклеїти етикетки. Прилить в кожну пробірку 2 мл молока, перемішати і поставити другу пробірку в крижану воду, а дві інші - у водяну баню при 38-40 В° С на 8-10 хв. p align="justify"> Спостерігати, що станеться з молоком в першій і третій пробірках.
Прослідкуйте, чи відбуваються зміни з молоком у крижаній воді.
Помістіть другу пробірку з крижаної води в баню при температурі 38-40 В° С і спостерігайте, згорнеться чи молоко. Зробіть загальний висновок за двома дослідам про впливу низької і високої температури на активність ферментів. p align="justify"> Контрольні запитання
1. Яка залежність між температурою і швидкістю ферментативних реакцій? p align="justify">. Наведіть приклади використання високих і низьких температур у тваринництві, молочної та харчової промисловості, в побуті. p align="justify">. Зобразіть графічно вплив температури на швидкість реакції за участю неорганічних каталізаторів і біологічних каталізаторів-ферментів. Поясніть відмінність. br/>
Робота 5. Вплив рН на дію ферментів (2 години)
Мета заняття - вивчити вплив концентрації водневих іонів на ферментативну активність амілази слини.
Зміст роботи. Провести гідроліз крохмалю в присутності слини при різній кислотності середовища. Зробити висновки про швидкість ферментативної реакції при різному значенні рН. p align="justify"> Підготовка до заняття. Необхідно знати, що таке рН і як кислотність середовища впливає па дисоціацію і просторову конфігурацію білкової молекули, механізм дії ферментів, хімізм гідролізу крохмалю. p align="justify"> Література [4, с. 133-136, 139-144, 197-198, 252-253; 9, с. 154-182; 2, с. 299-324].
Питання для самоконтролю
1. Що таке фермент? p align="justify">. Яка хімічна природа ферментів? p align="justify"> З.Как впливає кислотність середовища на дисоціацію білків? 4.Чому концентрація водневі іонів в середовищі впливає на активність ферментів. p align="justify">. Як фарбуються йодом декстрини? p align="justify">. Як приготувати буферний розчин? p align="justify"> Апаратура і реактиви: водяна баня з термометром, штатив з пробірками, піпетки, розчин фосфату натрію однозаміщеного, фосфату натрію двузамещенного, розчин крохмалю, розчин йоду в йодистим калії.
Хід роботи
Пронумерувати шість пробірок і приготувати в них фосфатні буферні суміші з різним значенням рН за схемою:
Реактиви № пробірки 123456 № Н2Р04 (мл) № 2НР04 (мл) 4,7 0,34,4 0,62,5 2,51,7 3,30,6 4,40,3 4,7 рН буферної смесі5, 66,06,87,07,88,1 Забарвлення розчинів
В інші шість пробірок палити по 5 мл крохмалю, додати по 1 мл фосфатної буферної суміші з різним значенням рН. Потім в кожну пробірку додати по 1 мл розведеної слини (1:1), ретельно перемішати вміст пробірок і поставити на водяну баню при 38-40 В° С. Через 3-5 хв з пробірки № 3 взяти кілька крапель розчину і провести реакцію з йодом на склі. Повторити пробу до тих пір, поки не відбудеться повного розщеплення крохмалю (зберігається жовте забарвлення йоду). p align="justify"> Після цього пробірки вийняти з лазні і додати в кожну по 1 - 2 краплі йоду. Спостерігати появу різного забарвлення відповідно з глибиною ферментативного гідролізу крохмалю. p align="justify"> Записати результати в таблицю і зробити висновки про значення рН середовища, найбільш сприятливому для дії амілази.
Контрольні запитання
1. Поясніть, чому амілаза слини втрачає свою активність при попаданні в шлунок? p align="justify">. Де переважно здійснюється гідроліз крохмалю в організмі тварини? p align="justify">. Наведіть приклад ферменту, активного тільки в кислому середовищі. br/>
Робота 6. Активацію та гальмування дії ферменту амілази (2 години)
Мета заняття - вивчити вплив активаторів та інгібіторів на ферментативний гідроліз крохмалю.
Зміст роботи. Провести гідроліз крохмалю зі слиною в присутності іонів К +, Na +, С1-, Сu2 +, у водному розчині, зробити висновки про глибину ферментативного гідролізу крохмалю в присутності інгібіторів і активаторів. p align="justify"> Підготовка до заняття. Необхідно знати механізм ферментативного гідролізу крохмалю, роль активаторів ферментативних процесів, оборотні і необоротні інгібітори ферментів, механізми утворення активних ферментів з проферментов. p align="justify"> Література [2, с. 297; 3...
