прецизійних рідинних хроматографів, вдосконаленням техніки виконання аналізу. Широке використання методу ВЕРХ при визначенні вітамінів знайшло відображення і в числі публікацій. На сьогоднішній день більше половини всіх опублікованих робіт з аналізу як водо- так і жиророзчинних вітамінів присвячено застосуванню цього методу. Широке поширення при визначенні вітамінів отримали різні варіанти хроматографії. Для очищення токоферолу від сторонніх домішок використовують метод тонкошарової хроматографії У поєднанні зі спектрофотометрическими і Флуоріметріческійметод цим способом проводять і кількісне визначення вітаміну Е. При поділі використовують пластинки з Силуфол, кізельгелем Метод газової хроматографії рекомендований Державної Фармакопеєю (ГФ XI) для аналізу масляних розчинів а-токоферолу ацетату. Цим способом визначають вітамін Е у вигляді гептафторбутірільних похідних і в харчових продуктах. Аналіз ізомерів токоферолу в оливковій олії проводиться методом газо-рідинної хроматографії. Методики аналізу ГХ і ГЖХ вимагають отримання летючих похідних, що вкрай важко при аналізі жиророзчинних вітамінів. З цієї причини дані способи визначення не набули великого поширення. Визначення вітаміну Е в харчових продуктах, фармпрепаратах і біологічних об'єктах проводять в градієнтному і ізократіческом режимах як в нормально-фазових, так і в обернено-фазових умовах. В якості адсорбентів використовують силікагель (СГ), кизельгур, сіласорб, ODS-Гіперсіл та інші носії. Для безперервного контролю складу елюату в рідинної хроматографії при аналізі вітамінів і збільшення чутливості визначення використовують УФ (А,=292 нм), спектрофотометрический (Х=295нм), флуоресцентний (Х,=280/325нм), електрохімічний, ПМР- [81] і мас-спектроскопічний детектори. Більшість дослідників для розділення сумішей всіх восьми ізомерів токоферолів і їх ацетатів воліють використовувати адсорбційну хроматографію. У цих випадках рухомою фазою зазвичай служать вуглеводні, що містять незначні кількості якого-небудь простого ефіру. Перераховані методики визначення вітаміну Е, як правило, не передбачають попереднього омилення зразків, що істотно скорочує час виконання аналізу. Поділ з одночасним кількісним визначенням змісту жиророзчинних вітамінів (А, Д, Е, К) при їх сумісній присутності в полівітамінних препаратах проводять як на прямій, так і на зверненої фазах. При цьому більшість дослідників вважають за краще використовувати обернено-фазовий варіант ВЕРХ. Метод ВЕРХ дозволяє аналізувати водорозчинні вітаміни В1 і В2 як одночасно, так і окремо. Для поділу вітамінів використовують обернено-фазний, іон-парний і іонообмінний варіанти ВЕРХ. Застосовують як ізократіческій, так і градієнтний режими хроматографирования. Попереднє відділення визначених речовин від матриці здійснюють шляхом ферментативного і кислотного гідролізу проби. Переваги методу рідинної хроматографії: Одночасне визначення декількох компонентів; Усунення впливу заважаючих компонентів; Комплекс можна швидко перебудувати на виконання інших аналізів [4].
Склад і характеристика обладнання та програмного забезпечення для рідинного хроматографа хромосом ЖХ - 301 : Таблиця 1
Насос SSI серії IIIНасос для подачі елюента має низький рівень пульсаційДетектор спектрофотометрический СПФ - 1Детектор по вимірюванню поглинання (довжина хвилі 254 - 455 нм) Кран-дозаторПріменяется шестіпортовий двоходовий петлевий дозатор. Збільшення петлі дозування дозволяє збільшити чутливість аналіза.Насос SSI серії IIIДополнітельний насос може бути використаний для створення градієнта (необов'язковий) Колонки хроматографіческіеАналітіческая колонка Vydac 201SP54 250х4 мм або аналогічная.Вспомогательное обладнання для лабораторії рідинної хроматографііВакуумний насос для дегазації елюента .Програма збору і обробки хроматографічної інформації laquo ; хромосом 2.3. Робота одного комп'ютера з декількома хроматографами (кількість залежить від конфігурації комп'ютера). Методи розрахунку хроматограмм: абсолютна калібрування, внутрішній стандарт.
Переваги хроматографа хромосом ЖХ - 301 raquo ;: висока стабільність і точність підтримки витрати елюента забезпечується конструкцією насосів високого тиску. легкий доступ до колонок забезпечується конструкцією приладу. ефективність розділення забезпечується застосуванням високоефективних хроматографічних колонок. широкий лінійний діапазон вимірювального сигналу детекторів без перемикань межі вимірювання, що дозволяє з високою точністю вимірювати піки як великий, так і малій концентрації.
Хроматограмма аналізу водорозчинних
аскорбінова кислота (C), 2 нікотинова кислота (Niacin), 3 піридоксин (B6), 4 тіамін (B1), 5 нікотинамід (B3), 6 фолієва кислота (M), 7 ціанокобаламін (B12 ), 8 рибофлавін (B2).
Хроматограмма аналізу жиророзчинних вітамінів: 1. Вітамін А 2. токола 3. y -то...
