я при збереженні прозорості без утворення опадів, що необхідно для глибинного культивування але не обов'язково для щільних поживних середовищ і середовищ для зберігання культур. p align="justify"> При конструюванні синтетичних поживних середовищ і добавок замінюють компоненти поживних середовищ невідомого або складного складу на суміші індивідуальних хімічних сполук меншого різноманітності, або значно знижують концентрації невідомих або варіабельних компонент.
Всі компоненти поживних середовищ можна розбити на досить незалежні групи. Перша група - неорганічні компоненти. У першу чергу макроелементи. Це, перш за все, солі фосфорної кислоти, натрій, калій, магній, залізо. Потім необхідно відзначити мікроелементи - сірка, кобальт, нікель, цинк, мідь і т.д. /16 /. p align="justify"> Наступний клас - органічні сполуки. На першому місці - джерела вуглецю, найчастіше - вуглеводи, сахароспирти, карбонові кислоти і ліпіди. Зазначені сполуки можна розбити на групи - необхідні, взаємозамінні, нейтральні, що не утилізуються і токсичні. Методом повного або обмеженого перебору в серії однофакторних експериментів нескладно обгрунтовано вибрати найкращу добавку. Вуглеводи утилізуються кожен за своєю схемою і конкурують між собою, зазвичай глюкоза або фруктоза засвоюються в першу чергу. Вуглеводи немає сенсу перевіряти в сумішах. Так само і карбонові кислоти. Нерідко вуглеводи і карбонові кислоти не конкурують, а доповнюють один одного, Утилізуємо продуцентом за різними біохімічним шляхах. Ліпіди теж можуть не конкурувати з вуглеводами і карбоновими кислотами і можуть бути замінені водорозчинними Двомісна/2,16 /. І вже на цій стадії серія однофакторних експериментів обмежена в своїй користі. Особливих складнощів при роботі з цими компонентами немає. Особливої вЂ‹вЂ‹чистоти інших реактивів при їх пошуку не потрібно. Достатньо лише бути впевненим у відсутності потенційно конкуруючих домішок, наприклад відсутність глюкози в галактози, хімічна чистота або відомий склад жирних кислот і т.д.
На першій стадії найбільш простим кроком буде використання мінеральної основи, описаної для родинного мікроорганізму, з додаванням сумішей амінокислот і вітамінів і випробування різноманітних джерел вуглецю, при мінімальних добавках компонент невідомого або вариабельного складу. Ця частина роботи може бути виконана за класичною схемою як серія однофакторних експериментів. Але, якщо буде знайдено, що бажано або необхідно одночасна присутність в середовищі як деякого вуглеводу, так і який - ні будь карбонової кислоти і ліпіду, то метод Зайделя-Гаусса призведе до не завжди виправданою необхідності постановки великої кількості експериментів. p align="justify"> Для хемоорганотрофи потрібні сполуки азоту у вигляді амінокислот і коротких пептидів, що залишаються в розчинній вигляді після автоклавування (пептони)/16 /. Можливо позитивний вплив і біогенних амінів (аспарагін, глутамін і т.д.). У більшості випадків можна обмежитися тільки набором найбільш поширених індивідуальних 20 ти , хоча в деяких випадках пептиди можуть бути регуляторними факторами при синтезі конкретного ЦП. Амінокислоти можуть вимагатися не всі, найбільш часто вживані 20, а лише деякі. Для цього необхідно поставити багатофакторний активний відсіває експеримент і вибрати мінімальну групу амінокислот, що забезпечують потрібний ВП.
При цьому найбільш логічно фіксувати макро і мікро елементи і джерело вітамінів, в більшості випадків, дріжджовий екстракт у розведеному вигляді, щоб зменшити внесок амінокислот. Іноді застосовують який - ні будь полівітамінний комплекс медичного або ветеринарного призначення, стерилізований фільтруванням. Це більш підходящий варіант, оскільки не містить власних амінокислот і пептидів, ширше за змістом вітамінів, а можливі вуглеводи та інші добавки можна врахувати, або значно зменшити їх вплив розведенням. p align="justify"> Пошук мінімальної групи необхідних амінокислот можна робити, ставлячи ОЕ за методом випадкового балансу на основі наднасичене плану Бута і Кокса (число перевіряються факто рів більше кількості випробувань в серії експериментів) таб.1/цит. по 1 /. Названа серія випробувань дозволяє перевірити 20 найбільш часто зустрічаються незамінних амінокислот на 12 ти експериментальних точках. Для цього роблять різні групові вибірки амінокислот із загального числа, по близькому до оптимального плану, який найпростіше відобразити у вигляді таблиці.
Одиничність плану таб.1 не доведена, можливі імпровізації. План близький до оптимального, оскільки практично всі теоретично можливі парні поєднання чинників враховані з рівними частотами (більшість вектор - стовпців ортогональні). Але це в літературі не вказано/1 /. Згідно особистому досвіду, пошукові багатофакторні плани на основі серії експериментів ...
