зі сумішей близьких за властивостям органічних сполук (некаталітичного варіант);
В· при визначенні мікрокількостей іонів 3d-елементів, групи платинових металів, ряду аніонів (I пЂ, Cl пЂ , Br пЂ) і органічних речовин у природних і промислових об'єктах;
В· при визначенні присутності токсичних і лікарських препаратів, фізіологічно активних сполук у біологічних об'єктах і об'єктах навколишнього середовища (ферментативні методи).
РОЗДІЛ 2. ДЕЯКІ ОСНОВНІ ВІДОМОСТІ про ферменти
Ферменти - Біологічні каталізатори білкової природи, що прискорюють хімічні реакції в живих організмах і поза ними. Ферменти мають унікальні властивості, які виділяють їх на тлі звичайних органічних каталізаторів гомогенного типу. Перш за все це надзвичайно висока каталітична активність. Так, добавка незначній концентрації ферменту (10 - 9-10 - 7 М) прискорює перетворення субстрату в 108-1012 разів. Інше, не менш важлива властивість ферментів - специфічність (вибірковість) їх дії відносно структури субстрату, типу реакції і умов її проведення. Специфічність визначається здатністю ферменту перетворювати тільки даний тип субстратів в певних реакціях і умовах. Ці властивості ферментів обумовлені складною структурою макромолекул білка і вельми складним механізмом їх дії.
Перетворення субстрату відбувається на активному центрі ферменту. Для багатьох ферментів, що складаються з субодиниць, характерна наявність регуляторного ділянки, яка взаємодіє з речовинами, впливають на активність ферменту, - активаторами, інгібіторами або инактиваторов (рис. 4).
Важливим властивістю ферментів, яке необхідно враховувати при їх практичному використанні, є стабільність, тобто здатність зберігати каталітичну активність. При зберіганні і особливо в ході ферментативної реакції фермент може частково або повністю втрачати свою каталітичну активність, іншими словами, инактивироваться. Одним з ефективних способів стабілізації ферментів є їх іммобілізація - переведення у водонерозчинного стан шляхом зв'язування з носієм або модифікування водорозчинними полімерами з повним або частковим збереженням ферментами каталітичної активності. Підвищення стабільності і можливість багаторазового використання іммобілізованих ферментів значно підвищують економічність ферментативних методів аналізу.
2. 1. Можливості ферментативних методів аналізу
Межі виявлення речовин, що визначаються ферментативними методами (субстратів, активаторів, оборотних і необоротних інгібіторів і инактиваторов ферментів) залежать не тільки від каталітичної активності ферменту, а й від інших кінетичних характеристик використовуваної індикаторної реакції. Фермент каталізує реакції, в яких беруть участь, як правило, один або два субстрату. Найпростіша односубстратная реакція описується зазвичай схемою Міхаеліса-Ментен
E + S ES P + E,
де Е - фермент, S - субстрат, ES - проміжний комплекс ферменту ...
